Geändertes Verfahren zum Nachweis von Coliformen Bakterien und Escherichia coli

Nach Vorgabe der Trinkwasserverordnung 2001, zuletzt geändert am 07.08.2013, erfolgt der Nachweis dieser Parameter gemäß der Norm DIN EN ISO 9308-1. In der Fassung von 2001 sieht diese Norm die Verwendung des Laktose-TTC-Agars vor. Der Nachweis von Coliformen Bakterien und E. coli beruht dabei auf der Eigenschaft dieser Bakterien, den Zucker Laktose abzubauen und dabei das Kulturmedium anzusäuern. Aufgrund dieser Definition zählten die Vertreter der Gattungen Citrobacter, Enterobacter, Escherichia und Klebsiella zu der Gruppe der Coliformen Bakterien.

Nach der Neufassung der DIN EN ISO 9308-1 Ende Dezember 2014 werden jetzt alle Bakterien als Coliforme Bakterien definiert, die über eine ß-D-Galaktosidase-Aktivität verfügen. Diese Enzymaktivität wird mit Hilfe eines neuartigen Chromogenen Nährbodens nachgewiesen, der den bisherigen Laktose-TTC-Agar ersetzt. Neben den oben genannten Gattungen erfüllen nun vor allem auch Bakterien der Gattungen Hafnia und Serratia diese Bedingungen. Die Bakterien dieser Gattungen können sowohl im Darm von Warmblütern als auch in der Umwelt vorkommen.

Unsere Kompetenz im Nachweis von Coliformen Bakterien und Escherichia coli nach dem neuen Verfahren haben wir als eines der ersten Labore deutschlandweit in zwei erfolgreichen Ringversuchen unter Beweis gestellt. Ein Zusatz in unserer Akkreditierungsurkunde umfasst auch die Neufassung von bereits akkreditierten Verfahren. Im Prüfbericht wird das neue Verfahren ab Februar als DIN EN ISO 9308-1: 2014-12 bezeichnet.

Das Nachweisverfahren für Clostridium perfringens wird sich übrigens demnächst ebenfalls ändern. Hier steht der genaue Termin noch nicht fest. Wir werden Sie aber rechtzeitig informieren.

Für Rückfragen zum neuen Verfahren steht Ihnen Herr Dr. M. Preuß gerne zur Verfügung.

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Abbildung: Vergleich Laktose-TTC-Agar (links) und neuer Chromogener-Coliformen-Agar

Als Teststämme wurden Klebsiella pneumoniae (oben) und Serratia marcescens (unten) verwendet. Auf dem Laktose-TTC-Agar säuert nur K. pneumoniae das Nährmedium an (Gelbfärbung), während S. marcescens nur einen schwachen blauen Farbumschlag verursacht und somit nicht zu den Coliformen Bakterien gezählt wird. Auf dem Chromogenen-Coliformen-Agar erscheinen sowohl die Kolonien von K. pneumoniae als auch von S. marcescens rosa bis rot (positiver Nachweis der ß-D-Galaktosidase). Somit lautet hier das Ergebnis vier Coliforme Bakterien.